顯微鏡在核孔復合組織提出了新的見解:核孔復合物 (NPC)在核膜一個大的蛋白質復合物,表示其柵極連接到所述真核基因構成。 這種復雜的由幾百形成為注定要進入或離開核化合物的選擇性柵極蛋白質。
正因為如此出色的功能NPC的結構是很大的興趣。 到目前為止,全國人大結構分析已主要限于結晶研究或電子顯微鏡。 單組分的幾種結構已經被破譯通過晶體學。 然而,復雜的內各個蛋白質的組織仍然難以捉摸。 一個間隙現已關閉通過使用超分辨率顯微鏡。
揚Ellenberg和他的科學家團隊在EMBL海德堡已經獲得了新的見解的NPC結構的顯微鏡基態(tài)損耗(GSD)的幫助。
安娜·辛波絲卡*近公布的這項研究的科學文章中的結果“核孔支架結構由超分辨率顯微鏡和粒子平均分析”和她的成就的意見和基態(tài)損耗顯微鏡的蛋白復合物的分析在隨后的采訪中的潛力。
GSDIM方法的研究優(yōu)勢有哪些?
在我們的研究中,我們試圖了解大型多蛋白復合物,如核孔復合物(NPC),都建立。 因為它們的尺寸和復雜性,例如分子機器都超出了單個方法的范圍和長期以來一直用于結構生物學的一個挑戰(zhàn)。 原子分辨率的方法,例如X射線晶體學或核磁共振需要純化的樣品,并且不適合于非常大的集。 雖然,電子顯微鏡可以觀察大復合體在其天然環(huán)境中的細胞,它往往是很困難的分配的電子密度,以個別蛋白質。 在熒光顯微鏡中的蛋白質的身份是已知的,超分辨率(SR)現在讓我們來可視化低于衍射JI限的細節(jié)。 當SR被結合的顆粒平均,蛋白'位置可以被映射到一個亞納米精度,一個尺度,使得適用于大型復合結構的研究光鏡。 因此SR顯微鏡可以連接不同類型的數據,*終幫助生成的多蛋白組件偽原子模型。 此外,特別是GSDIM等本地化SR方法的一大優(yōu)勢是,他們使用比較簡單,并定期讓蛋白,是10-20納米相隔的分辨率。 這對我們來說很重要,因為我們能夠獲得大的數據集,并期待在許多不同的標記在一個相對有效的方式。