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超分辨熒光顯微鏡可以識別與癌細胞孵育的血小板中特定的蛋白質分布模式

返回列表 來源:本站 發布日期:2023-06-07 09:58:49【

血小板的蛋白質含量經常在腫瘤發展和轉移時改變。然而,癌細胞如何影響血小板內蛋白質選擇性的重新分布和釋放,從而促進腫瘤的發展,在很大程度上仍然遙遙無期。通過基于熒光的超高分辨率激發發射耗竭(超分辨顯微鏡)成像,我們揭示了與腫瘤進展和轉移有關的特定蛋白質在血小板中如何在可溶性激活劑(凝血酶,二磷酸腺苷和血栓烷A2)下重新分布。與癌細胞(MCF-7,MDA-MB-231,EFO21)或非癌細胞(184A1,MCF10A)一起孵育。癌細胞孵育后,發現細胞粘附蛋白P-選擇素重新分布為圓形納米結構,與血小板內儲存蛋白的α-顆粒向膜內的積累相一致。

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這些變化的程度要小得多,甚至根本不存在于與正常細胞孵育的血小板中,或在經歷了可溶性血小板活化劑作用的血小板中。從這些模式中,我們開發了一種分類程序,通過該程序可以自動,客觀地識別暴露于癌細胞,非癌細胞,可溶性激活劑以及未激活血小板的血小板。我們證明,與電子顯微鏡和共聚焦顯微鏡相比,超分辨顯微鏡成像具有必要的空間分辨率和標記效率,可以識別血小板中的蛋白質分布模式,并可以解決它們在不同激活情況下如何發生特異性變化。結合血小板內特定蛋白質分布模式的圖像分析,超分辨顯微鏡成像可因此在未來基于血小板的癌癥診斷和治療監測中發揮作用。提出的方法還可以使癌細胞-血小板相互作用的基本機制和非接觸式細胞間相互作用大體上更加清晰。

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